 4-氯鄰苯二酚 4,5-二氯兒茶酚 3,4,5-三氯鄰苯二酚/3,4,5-三氯兒茶酚 3,4,5,6-四氯-1,2-苯二醇 4,5-二氯愈創(chuàng)木酚 4,5,6-三氯愈創(chuàng)木酚 3,4,5-三氯愈創(chuàng)木酚 四氯愈創(chuàng)木酚 4,5-二氯藜蘆醚 3,4,5-三氯藜蘆醚 四氯藜蘆醚 4-氯-2-甲氧基苯酚 三氯紫丁香醇 5,6-二氯香蘭素 2-氯-4-羥基-5-甲氧基苯甲醛 4,6-二氯愈創(chuàng)木酚 3,5-二氯鄰苯二酚/3,5-二氯兒茶酚 3,4,6-三氯鄰苯二酚/3,4,6-三氯兒茶酚 3,4-二氯鄰苯二酚/3,4-二氯兒茶酚 脫氫松香酸 松香酸 新松香酸 異海松酸 左旋海松酸 長葉松酸 山達(dá)海松酸 一氯脫氫松香酸 二氯脫氫松香酸 對甲基羅漢松酸 海松酸 二氫異海松酸 8(14)-二氫松香酸 8-二氫松香酸 7-羰基脫氫松香酸 9,10-二氯硬脂酸 甲磺酸帕珠沙星消旋體對照品 匹伐他汀鈣對照品(獨家?guī)в芯头治? 鹽酸吡柔比星參比制劑 1,1-二溴丙酮 1,1,1-三溴丙酮 1,1,3-三溴丙酮 1,1-二溴-3-氯丙酮 1,1-二溴-3,3-二氯丙酮 1,3-二溴-1,3-二氯丙酮 1,1,3-三溴-3-氯丙酮 1,1,3,3-四氯乙酮 1,1,1,3-四氯丙酮 一氯硝基甲烷 二氯硝基甲烷 一溴二氯硝基甲烷
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| 頭孢菌素類仿制藥的雜質(zhì)譜研究 |
| 2018-11-12 |
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頭孢菌素仿制品種需按照ICH的雜質(zhì)研究指導(dǎo)原則和EMA的《抗生素有關(guān)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)制訂指導(dǎo)原則》相關(guān)要求,對每一個品種進(jìn)行相應(yīng)的雜質(zhì)譜研究。但國內(nèi)仿制品種眾多,且頭孢菌素雜質(zhì)譜的研究具有量少且不穩(wěn)定的特點。按照傳統(tǒng)的制備分離方法,工作繁雜且有效性差。本論文結(jié)合已上市品種的雜質(zhì)研究信息,根據(jù)共有的降解反應(yīng)機(jī)理,采用柱切換-液質(zhì)聯(lián)用的方法,分別對已知結(jié)構(gòu)信息雜質(zhì)、未知結(jié)構(gòu)信息雜質(zhì)中異構(gòu)體雜質(zhì)、聚合物雜質(zhì)分別進(jìn)行研究。建立雜質(zhì)研究決策樹,并提出相關(guān)研究規(guī)則,其主要內(nèi)容分為三個部分：1.采用柱切換-LC/MS/MSn和柱切換-HRMS技術(shù)對頭孢孟多酯鈉、頭孢唑肟鈉混合雜質(zhì)對照品、頭孢替唑鈉混合雜質(zhì)對照品、頭孢曲松鈉混合雜質(zhì)對照品進(jìn)行系統(tǒng)研究。建立了頭孢菌素類仿制藥物已知結(jié)構(gòu)信息雜質(zhì)研究的決策樹：利用雜質(zhì)譜分析確定雜質(zhì)數(shù)目,通過降解試驗來判斷是工藝雜質(zhì)或者是降解雜質(zhì),采用LC/MS技術(shù)確定目標(biāo)雜質(zhì)分子量,并根據(jù)原料藥的質(zhì)譜裂解規(guī)律分析,推測雜質(zhì)的可能結(jié)構(gòu),最后通過高分辨質(zhì)譜確證元素組成,確證雜質(zhì)結(jié)構(gòu)式。2.采用制備液相富集異構(gòu)體雜質(zhì),利用光譜、質(zhì)譜和核磁共振技術(shù)對頭孢孟多酯鈉、頭孢唑肟鈉混合雜質(zhì)對照品、頭孢替唑鈉混合雜質(zhì)對照品、頭孢曲松鈉混合雜質(zhì)對照品中異構(gòu)體雜質(zhì)進(jìn)行系統(tǒng)研究。根據(jù)實驗方法及研究結(jié)果,建立頭孢菌素類仿制藥物未知結(jié)構(gòu)信息雜質(zhì)—異構(gòu)體雜質(zhì)研究的決策樹：利用液質(zhì)方法確定雜質(zhì)為異構(gòu)體,結(jié)合紫外光譜數(shù)據(jù),判斷最大吸收波長是否一致,如果不一致,且發(fā)生藍(lán)移,推測為△-3異構(gòu)體雜質(zhì),利用多級質(zhì)譜中存在的特征性碎片離子,驗證雜質(zhì)為△-3異構(gòu)體；如果一致,結(jié)合結(jié)構(gòu)特點和降解試驗來判斷異構(gòu)體雜質(zhì)種類：光降解試驗產(chǎn)生順反異構(gòu)體,部分頭孢菌素品種通過二級質(zhì)譜的特征碎片離子可確證結(jié)構(gòu)；堿性降解試驗產(chǎn)生RS異構(gòu)體,其他降解試驗產(chǎn)生側(cè)鏈異構(gòu)體,利用光譜和質(zhì)譜技術(shù)不能確證分析雜質(zhì)結(jié)構(gòu),可通過制備液相富集純化目標(biāo)雜質(zhì),利用核磁技術(shù)確證結(jié)構(gòu)。3.利用中國藥典的頭孢菌素類有關(guān)物質(zhì)檢查方法,調(diào)整有機(jī)相比例,通過柱切換-LC/MS/MSn技術(shù)研究頭孢唑肟鈉、頭孢氨芐、頭孢嗪咪鈉、頭孢噻肟鈉、頭孢西丁鈉中二聚體雜質(zhì),推測各類型聚合物雜質(zhì)的聚合方式,對聚合雜質(zhì)類型進(jìn)行總結(jié)。建立十八烷基硅膠柱對聚合物的檢查方法,經(jīng)方法學(xué)驗證,所建立的方法可滿足二聚體雜質(zhì)的有關(guān)物質(zhì)檢查。根據(jù)研究內(nèi)容,分別建立各類雜質(zhì)研究決策樹,并提出研究規(guī)則：規(guī)則1.如果雜質(zhì)峰的保留時間,UV光譜和MS信息(分子量和二級質(zhì)譜碎片)與對照品相同,則認(rèn)為雜質(zhì)與對照品結(jié)構(gòu)一致。規(guī)則2.對工藝雜質(zhì)(反應(yīng)前體、起始物、中間體),如可以獲得實物,可參照規(guī)則1確認(rèn)結(jié)構(gòu)：如無法獲得實物,應(yīng)結(jié)合MS裂解規(guī)律和HRMS數(shù)據(jù)對結(jié)構(gòu)進(jìn)行確證。規(guī)則3.對降解雜質(zhì),如具降解反應(yīng)機(jī)理明確,如β-內(nèi)酰胺開環(huán)、3位側(cè)鏈水解等,可根據(jù)反應(yīng)機(jī)理設(shè)計加速試驗驗證降解物是否符合已知的降解機(jī)理,并參照規(guī)則2對結(jié)構(gòu)進(jìn)行確證。規(guī)則4.對異構(gòu)體雜質(zhì),除了△3異構(gòu)和7位具有氨噻肟結(jié)構(gòu)的頭孢菌素的反式異構(gòu),可通過光譜、質(zhì)譜技術(shù)確證結(jié)構(gòu)外,其他還需要結(jié)合NMR等分析結(jié)果確證結(jié)構(gòu)；對R、S異構(gòu)體至少需要H1 NMR數(shù)據(jù)確證異構(gòu)位點。規(guī)則5.建立十八烷基硅膠柱檢查聚合雜質(zhì)方法,可通過柱切換—LC/MS/MSn可確定其類型(二聚體、三聚體),并經(jīng)柱切換—HRMS技術(shù)驗證結(jié)構(gòu),但無法判斷其聚合位點。本論文的研究內(nèi)容是β-內(nèi)酰胺類抗生素雜質(zhì)譜研究中的一部分,本研究內(nèi)容有助于藥物分析工作者快速、準(zhǔn)確、有效的分析頭孢菌素類仿制藥的雜質(zhì)譜,有利于國內(nèi)頭孢菌素類仿制藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提高,快速提升國內(nèi)制藥企業(yè)的仿制藥生產(chǎn)水平,保障頭孢類藥物用藥的安全性和有效性。
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
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